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培養基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配制而成的營養基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。
培養基的配制一般包含配料、溶解、調PH、過濾、分裝、包扎、滅菌、切斜面、貯存這幾個步驟。今天小編就為大家分享一下培養基配置時應注意的幾項原則。
01
目的明確
培養不同的微生物必須采用不同的培養條件;培養目的不同,原料的選擇和配比不同;例如枯草芽孢桿菌:
一般培養:肉湯培養基或LB培養基;
自然轉化:基礎培養基;
觀察芽孢:生孢子培養基;
產蛋白酶:以玉米粉、黃豆餅粉為主的產酶培養基;
根據不同的工作目的,微生物不同的營養需要,運用自己豐富的生物化學和微生物學知識來配制優質的培養基。
02
營養協調
微生物細胞組成元素的調查或分析,是設計培養基時的重要參考依據。
微生物細胞內各種成分間有一較穩定的比例。
在大多數化能異養菌的培養基中,各營養要素間在量上的比例大體符合以下十倍序列的遞減規律:
要素:H2O>C源+能源>N源>P、S>K、Mg>生長因子
含量:(~10-1)(~10-2)(~10-3)(~10-4)(~10-5)(~10-6)
03
理化適宜
指培養基的pH值、滲透壓、水活度和氧化還原電勢等物理化學條件較為適宜。包括:pH、滲透壓和水活度、氧化還原電位。
(1)pH
各大類微生物都有其生長適宜的pH范圍,培養基的pH必須控制在一定的范圍內,以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產生代謝產物。
微生物的生長、代謝過程中會產生引起培養基pH改變的代謝產物,為了維持培養基pH的相對恒定,通常要進行pH的調節。
(2)滲透壓和水活度
滲透壓(osmotic pressure)是某水溶液中一個可用壓力來量度的一個物化指標。
水活度即aw(wateractivity)是一個比滲透壓更有生理意義的一個物化指標。它表示在天然或人為環境中,微生物可實際利用的自由水或游離水的含量。
(3)氧化還原電勢(redox potential)
又稱氧化還原電位,是度量某氧化還原系統中還原劑釋放電子或氧化劑接受電子趨勢的一種指標。
一般以Eh表示,它是指以氫電極為標準時某氧化還原系統的電極電位值,單位是V(伏)或mV(毫伏)。